苏秀娟^1,2 , 刘建喜³ , 徐海江⁴ , 曲延英^1,2 , 陈全家^1,2

1 新疆农业大学农学院, 乌鲁木齐, 830052;
2 新疆农业大学农业生物技术重点实验室, 乌鲁木齐, 830052;
3 新疆兵团种子管理总站, 乌鲁木齐, 830011;
4 新疆农业科学院经济作物研究所, 乌鲁木齐, 830091
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13 卷, 第 23 篇   doi: 10.13271/j.mpb.013.000641
收稿日期: 2014年05月19日    接受日期: 2014年07月30日    发表日期: 2014年11月30日

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本研究以19份薰衣草品种为材料，采用正交设计对ISSR-PCR反应中的5个影响因素：DNA浓度、Taq DNA聚合酶用量、Mg²⁺浓度、引物浓度、dNTP浓度，进行5个水平的优化试验，并在48℃~59℃范围内摸索退火温度。研究结果建立了稳定的、可重复的薰衣草ISSR最佳反应体系和PCR扩增参数。在20 μL的反应体系中，DNA模板浓度为2.50 ng/μL，Mg²⁺浓度为2.00 mmol/L，dNTP浓度为0.20 mmol/L，引物浓度为0.40 μmol/L，Taq DNA聚合酶为0.75 U，退火温度为52℃。该体系可为开展薰衣草种质资源的遗传多样性分析评价奠定基础。

薰衣草；ISSR；正交设计；6个因素；5个水平